BB-410382 Annexin V Alexa Fluor 660 / NucGreen 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
BB-41039 Annexin V-PE-Cyanine5 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
BB-4104 細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒(PI)
BB-41043 細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒
BB-41044 細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒
BB-41045 細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒-綠色熒光
BB-41046 細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒-藍(lán)色熒光
BB-41047 細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒-深紅色熒光
BB-41048 細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒-橙色熒光
BB-41049 細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒
BB-410461 細(xì)胞同步化試劑盒
BB-4105 線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1法)
BB-41051 線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(Rho123法)
BB-41052 線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-10法)
BB-41053 線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(TMRE法)
BB-41054 線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(TMRM法)
貝博生物專注于生命科學(xué)研究用試劑產(chǎn)品的研究、開發(fā)、市場(chǎng)推廣和技術(shù)服務(wù)。致力于為中國廣大客戶提供量身定制的科研用試劑產(chǎn)品和專業(yè)技術(shù)服務(wù),幫助科研人員加速生物領(lǐng)域的研究進(jìn)展。 貝博生物將以高品質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)打造實(shí)力試劑品牌。
目前已上市了600多種蛋白提取試劑盒(動(dòng)物、植物、細(xì)菌、昆蟲、酵母等樣本及細(xì)胞器提取)及上千種的細(xì)胞檢測(cè)的相關(guān)產(chǎn)品-細(xì)胞凋亡、增殖毒性、細(xì)胞周期、膜電位檢測(cè)、細(xì)胞器熒光探針、活性氧ROS檢測(cè)、細(xì)胞自噬、細(xì)胞耗氧OCR、細(xì)胞外酸化率ECAR、缺氧檢測(cè)、粘附檢測(cè)、鈣離子檢測(cè)、膜通透性轉(zhuǎn)換孔檢測(cè)、膜流動(dòng)性檢測(cè)、外泌體、囊泡提取等。
————————————————————
使用 Annexin V/PI 試劑盒時(shí),如何避免假陽性 / 假陰性結(jié)果?
實(shí)驗(yàn)誤差多源于細(xì)胞狀態(tài)與操作細(xì)節(jié),可通過以下措施優(yōu)化:
1. 細(xì)胞處理關(guān)鍵步驟
消化避免過度:
貼壁細(xì)胞消化時(shí),胰酶作用時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜損傷,引起 PS 外翻(假陽性)。
優(yōu)化方案:用不含 EDTA 的胰酶消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓即終止(通常≤5 分鐘),并用含血清培養(yǎng)基中和胰酶。
避免細(xì)胞凋亡誘導(dǎo):
離心速度過高(如 > 1500 rpm)或重懸時(shí)吹打劇烈,可能人為誘導(dǎo)凋亡(假陽性)。
優(yōu)化方案:離心速度控制在 800-1000 rpm×5 分鐘,重懸時(shí)用移液槍輕柔吹打。
2. 染色與檢測(cè)注意事項(xiàng)
緩沖液與溫度控制:
Annexin V 結(jié)合 PS 依賴 Ca²?,需使用試劑盒配套的 Binding Buffer(含 Ca²?),避免用 PBS 稀釋(可能降低 Ca²?濃度)。
染色需在冰浴或 4℃進(jìn)行,防止常溫下細(xì)胞繼續(xù)凋亡(假陽性)。
PI 染色時(shí)機(jī):
染色后需立即上機(jī)檢測(cè)(≤1 小時(shí)),若延遲檢測(cè),PI 可能滲入早期凋亡細(xì)胞(假陽性)。
3. 對(duì)照設(shè)置
陽性對(duì)照:用 1 μM 喜樹堿(Camptothecin)處理細(xì)胞 4 小時(shí),誘導(dǎo)典型凋亡,驗(yàn)證試劑盒有效性。
陰性對(duì)照:
未處理細(xì)胞:排除自發(fā)凋亡;
單染 Annexin V 或 PI:排除非特異性結(jié)合(如 PI 單染時(shí),活細(xì)胞應(yīng)無熒光)。