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無酶細胞消化液

簡要描述:產(chǎn)品概述 product description (Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原,形成。經(jīng)常用于動物組織的培養(yǎng)細胞消化或者一些組織的消化,但對細胞有的潛在損害,尤其是在37℃環(huán)境下危害較大。 貝博無酶細胞消化液(Non-enzy Cell Detach Solution)不含等蛋白消化酶類,但能有效地使貼壁細胞與培養(yǎng)瓶皿表面脫離而達到分離細胞目的。其特點是:1、作用溫和;2、對細胞的損傷和破壞極小,不影響細胞生物學特性,是腫瘤細胞的細胞脫壁方法;3、可以在血清存在的情況下進行消化。 消化后的細胞可進行傳代培養(yǎng),亦可用于提取核蛋白和胞漿蛋白、Western Blot、免疫共沉淀等實驗,通常室溫下10min左右就可以消......

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2025-07-01
  • 訪  問  量:32

詳細介紹

保存溫度
-20℃保存
注意事項
1、長期存放請分裝后-20℃保存。
2、避免反復凍融。
3、凍存后溶解時注意重新混勻。
有效期
一年
儀器準備
1. PBS、培養(yǎng)液
2. 顯微鏡
3. 離心機
使用注意事項
1) 盡量減少反復凍融的次數(shù),以免失效。
2) 在使用細胞消化液的過程中,要特別注意避免消化液被細菌污染。
3) 細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 貼壁細胞的消化:
(1) 吸除培養(yǎng)液,用無菌PBS、培養(yǎng)液洗滌細胞1次;
(2) 加入少量無酶細胞消化液,略蓋過細胞即可。(一般按細胞的有效體積的10倍添加)
(3) 室溫放置10min (如置于37℃脫壁反應會加速),直至細胞脫壁。(不同細胞消化時間有差異)。亦可用顯微鏡觀察,如果細胞明顯收縮并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍頭吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除消化液。
(4) 加入細胞培養(yǎng)液或5倍體積的PBS緩沖液終止反應。如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則再加入無酶細胞消化液重新消化。
(5) 1000-2000g離心3-5min,沉淀細胞,棄上清,盡量吸除無酶細胞消化液,加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。

2. 組織的消化:
(1) 用無菌PBS、培養(yǎng)液洗滌組織1次,用無菌的刮勺或茶匙將剪碎的組織碎片轉(zhuǎn)移至合適容器。
(2) 按組織有效體積的5-10倍,加入無酶細胞消化液。
(3) 置于37℃作用4-48小時,無需振蕩,不同的細胞消化時間有所不同。對于較難分解的腫瘤細胞,可作用5天或更長時間,但應重新用消化液懸浮。
(4) 吹打組織碎片數(shù)次,釋放松散的細胞,輕輕晃動培養(yǎng)瓶或皿,倒置顯微鏡下檢查分離情況。當細胞量少和/或在組織碎片中仍可見細胞時,需要繼續(xù)消化。
(5) 1000-2000g離心3-5min,沉淀細胞,棄上清,盡量吸除無酶細胞消化液,加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。

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