細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

簡要描述：產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBcellProbe® 細(xì)胞周期檢測試劑盒是利用細(xì)胞內(nèi)DNA能夠和熒光染料結(jié)合的特性，細(xì)胞各個(gè)時(shí)期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同，流式細(xì)胞儀檢測的熒光強(qiáng)度也不一樣來檢測細(xì)胞周期。細(xì)胞周期（cell cycle)是指細(xì)胞從前一次分裂結(jié)束起到下一次分裂結(jié)束為止的活動過程，通常由G0/G1期、S期、G2期和M期組成。G1期：細(xì)胞開始RNA和蛋白質(zhì)的合成，但DNA含量仍保持二倍體。S期：DNA開始合成，這時(shí)細(xì)胞核內(nèi)DNA的含量介于G1期和G2期之間。當(dāng)DNA復(fù)制結(jié)束成為4倍體時(shí)，細(xì)胞進(jìn)入G2期。G2期的細(xì)胞繼續(xù)合成RNA及蛋白質(zhì)，直到進(jìn)入M期。因此，單純從DNA含量無法區(qū)分G2期和M期。一旦有絲分裂發(fā)生，細(xì)胞分裂成兩個(gè)細(xì)胞，這兩個(gè)細(xì)胞或者進(jìn)入下一個(gè)細(xì)胞周期......

產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間：2025-06-27
訪問量：5

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產(chǎn)品分類

CLASSIFICATION

細(xì)胞分析

檢測試劑盒細(xì)胞成像細(xì)胞自噬細(xì)胞代謝 ROS檢測細(xì)胞活性細(xì)胞增殖細(xì)胞周期細(xì)胞凋亡細(xì)胞抑制劑細(xì)胞粘附細(xì)胞pH檢測細(xì)胞耗氧與酸化細(xì)胞示蹤與追蹤離子指示劑及膜電位查看全部產(chǎn)品

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詳細(xì)介紹

保存溫度

-20℃避光

注意事項(xiàng)

1.染液短期2周內(nèi)可以2-8℃保存。染料長期不用可以-20℃保存。避免反復(fù)凍融。
2.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

1年

檢測方法

流式細(xì)胞儀

適用樣本

1.懸浮細(xì)胞 2.貼壁細(xì)胞

產(chǎn)品應(yīng)用

流式細(xì)胞儀

儀器準(zhǔn)備

1.流式細(xì)胞儀
2.離心機(jī)
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒

試劑準(zhǔn)備

1.PBS 緩沖液（pH7.4，實(shí)驗(yàn)室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））
2.或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution）

耗材準(zhǔn)備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項(xiàng)

1.細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
2.使用含EDTA的細(xì)胞消化液。
3.洗滌細(xì)胞離心轉(zhuǎn)速不可超過800×g。
4.乙醇固定時(shí)離心大概采用2000×g力5分鐘，離心力太小可能部分細(xì)胞難以沉淀。? 5.固定時(shí)在振蕩器上輕輕振蕩細(xì)胞，并緩慢滴加75%乙醇，直接加入會導(dǎo)致細(xì)胞團(tuán)聚的現(xiàn)象，很難重懸成單細(xì)胞。或者先用冷PBS懸浮細(xì)胞，充分懸浮，使細(xì)胞充分分散成單細(xì)胞。之后緩慢加入無水乙醇，終濃度為70-90%乙醇。乙醇固定之后須無細(xì)胞沉淀。

使用方法

1. 收集樣本細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)量在1-5*106個(gè)。
2. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次。
3. 在15ml離心管中，用500 μl PBS重懸細(xì)胞。
4. 慢慢滴加冷的無水乙醇或95%乙醇至終濃度為70%-80％冰凍乙醇。-20℃固定1小時(shí)或4℃固定過夜。
5. 在1000g離心10分鐘，棄上清，收集細(xì)胞。
6. 用冷PBS洗滌細(xì)胞一次。
7. 用500 μl冷PBS重懸細(xì)胞。
8. 加入Rnase A溶液20 μl， 37℃水浴30分鐘。
9. 400目篩網(wǎng)過濾。
10. 在1000g離心10分鐘，棄上清，收集細(xì)胞。
11. 加入400 μl PI染液重懸細(xì)胞，輕輕混勻后4℃避光孵育30分鐘-1小時(shí)。
12. 流式檢測結(jié)果。激發(fā)波長為488nm。采用適當(dāng)分析軟件進(jìn)行細(xì)胞DNA含量分析和光散射分析。

常見問題分析

1.染色后找不到細(xì)胞？
固定細(xì)胞可能難以離心沉淀；固定細(xì)胞可能成團(tuán)；固定細(xì)胞膜容易損傷成碎片。操作過程中注意以上幾點(diǎn)。

2.可以不固定細(xì)胞嗎？
本試劑盒可以用于非固定細(xì)胞的周期檢測。

參考文獻(xiàn)

1.Meng Zhang, et al.
lnc9141-a and -b Play a Different Role in Bovine Myoblast Proliferation, Apoptosis, and Differentiation
Molecular Therapy-Nucleic Acids 2019 （IF=5.919）

2.Jiebing Yang, et al.
Phenylboronic acid-modified polyamidoamine-mediated delivery of short GC rich DNA for hepatocarcinoma gene therapy
Biomaterials science 2019 （IF=5.831）

3.Wenqi Chen, et al.
Chondroitin sulfate-functionalized polyamidoamine as a tumor-targeted carrier for miR-34a delivery
Acta Biomaterialia 2017 （IF=6.383）

4.Feng Liu, et al.
Interleukin-6-stimulated progranulin expression contributes to the malignancy of hepatocellular carcinoma cells by activating mTOR signaling
Sci Rep. 2016; 6: 21260 （IF 5.228）

5.Fei Fei, et al.
The number of polyploid giant cancer cells and epithelial-mesenchymal transition-related proteins are associated with invasion and metastasis in human breast cancer
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 2015 （IF 6.217）

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